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Revista Ingeniantes 2017 Año 4 No.1 Vol.1

Para la obtención del biofertilizante, las cepas nati-             Cuadro 1. Morfología celular de las cepas elegidas
vas de los géneros Rhizobium sp. y Azospirillum sp.,
se sembraron en caldo, extracto de levadura Manitol                Cepas  Tamaño                        Tinción   Morfología  Movilidad
(caldo YMA) [12][33][36] y caldo libre de Nitrógeno con                     (m)                         Gram      en fresco
azul de bromotimol (caldo NFB) [11] respectivamente.
Se determinó su curva de crecimiento microbiano,                   MA-04          1.0                  Gram (–)  Bacilos     Flagelados
para calcular los parámetros cinéticos, y así estanda-                                                   Bacilos
rizar los procesos de obtención de los bio-inoculan-                                                      cortos
tes, que se aplicaron a las semillas de chayote, previo
a su siembra.                                                      MR-03          1.0                  Gram (–)  Bacilos     Flagelados
                                                                                                         Bacilos

Las semillas de chayote verde liso, fueron recolecta-              MA-04 (Azospirillum sp.) y MR-03 (Rhizobium sp.)
das en el mes de enero de 2016, en un predio localiza-
do a orilla de la carretera Fortín-Huatusco, a 19°01’12”           Cuadro 2. Morfología de colonia de las cepas elegidas. La morfo-
LN y 97°01’47” LW. En el municipio de Coscomate-                   logía de colonia de la cepa MR-03 se evaluó en medio agar 79 y
pec de Bravo, Veracruz. Fueron seleccionadas de 35                 la cepa MA-04 en agar NFB-RC
días después de antésis, con dimensiones de 17 ±
1.0 cm de largo, 12±0.5 cm de ancho ecuatorial y un                CEPA TDC TC CC DO EL FC B S IN
peso promedio de 415 g.
                                                               MR-03 2 3-5 B B E P E Li S
Las semillas de chayote inoculadas se sembraron en
bolsas de polietileno (30 cm ancho x 45 cm largo),             MA-04  1 4-6 R B P R E Li Li
que se llenaron con 7 (K). de suelo. Estas bolsas se
colocaron dentro del invernadero.                              TDC–Tamaño de las colonias en mm; TC–Tiempo de creci-
                                                               miento en días; CC–Color de las colonias (R: Roja, B: Beige);
Se evaluó el desarrollo vegetativo durante los 60 días         DO–Detalles ópticos (B: brillante); EL–Elevación (P: plana; E:
posteriores a la inoculación con el biofertilizante. Se        elevada); FC–Forma de las colonias (P: puntiforme, C: Circular,
aplicaron re-inoculaciones cada 15 días con alícuotas          I: Irregular); B–Borde (E: Entero); S–Superficie (Li: Lisa); IN–In-
de la misma concentración inicial (107 UFC mL-1) en un         vasión (S: Superficial, In: Invasiva).
volumen de 10 mL por cada semilla, que se aplicó di-
rectamente al sustrato en la base de la planta y cerca         Se realizó el análisis de varianza por Anova de las medias
de la raíz.                                                    obtenidas a los 60 días después de la siembra (dds) en
                                                               cada una de las variables de crecimiento, con un índice de
Cada 4 días se evaluaron y registraron los datos de            confianza (IC) del 95% y un nivel de significancia α=0.05;
las variables de crecimiento: longitud del tallo (cm)          con agrupación de medias utilizando el método de Ga-
apical más larga, diámetro de tallo, número de hojas           mes-Howell y una Prueba de Welch de las medias obte-
y número    de entrenudos. La   concentración  sdieemNbHra4+,  nidas por cada tratamiento (Tabla 3).
foliar se  cuantificó a los 60  después de la
mediante el método colorimétrico de Nessler con una                Cuadro 3. Análisis de varianza de las medias en las variables de
longitud de onda de 630 nm (Reactivo de Nessler: 100               crecimiento a los 60 dds.

g de  mHegzI2clya  70  g de KI en 50 mL de agua destilada.         Tratamientos  Longitud               Número de Número      Diámetro
Esta               se  añade posteriormente, a una solución                      del tallo              entrenudos de Hojas    de tallo

                                                                                    (cm)                                        (mm)

fría de 160 g de NaOH en 500 mL de agua destilada.                 1. Rhiz       188.2 a                20.9 a    37.2 b      8.5 b
Ambas soluciones se mezclan y se lleva a 1 L).                     2. Test-Rhiz  141.0 a                15.7 a    40.6 a b    8.7 a b
                                                                   3. Rhiz-SE    191.3 a                21.3 a    51.3 a      8.5 a b
Los datos de las variables de estudio de los seis                  4. Azos       231.9 a                19.6 a    40.0 a b    10.3 a
tratamientos establecidos se analizaron estadística-               5. Test-Azos  208.5 a                17.9 a    37.8 a b    10.1 a b
mente usando el paquete Minitab® 17.1.0, (2013).                   6. Rhiz-Azos  231.8 a                21.7 a    36.8 a b    9.5 a b

RESULTADOS Y CONCLUSIONES                                          Valor p0.05  0.086 NS               0.140 NS  0.009 *     0.021 *
Las cepas en cultivo axénico señaladas como MA-                        Valor F      2.60                   2.11     5.54        4.29
04 y MR-03 del género Azospirillum sp. y Rhizobium
sp. respectivamente. Se identificaron mediante                     Las medias obtenidas en la variable de la concentración
morfología celular (Tabla 1), morfología de colonia                Adenonviatr,ómgeednoian(tNeHu4n+)a,  se analizaron estadísticamente   con
(Tabla 2), pruebas bioquímicas y tinción de Gram                                                        prueba de Tukey al 5% (Tabla 4)  con
propias de cada uno de los géneros de estudio. Se                  una desviación estándar agrupada de 0.12892 y un nivel
determinó los parámetros cinéticos de crecimiento                  de confianza individual de 99.43%. Rhizobium favorece la
microbiano para estandarizar la obtención del inó-                 fijación de nitrógeno en la interacción con la planta de cha-
culo bacteriano.                                                   yote con un incremento significativo del 43.7%.

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