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Revista Ingeniantes Año 3 No. 1 Vol. 1
a esta situación, algunas especies de mosquitos que se
alimentan de la sangre del ser humano se convierten en
vectores de virus causantes de enfermedades. Por solo
mencionar algunas, a Aedes aegypti, Anopheles gambiae,
Culex pipiens, Psorophora ferox, Aedes scapularis, etc.
Entre los agentes virales transmitidos por la picadura de
mosquito se encuentran el DENV, el YFV, el WNV y el CHI-
KV causantes, respectivamente, de dengue [3, 4, 5], fiebre
amarilla [6], fiebre del Nilo occidental [7] y chinkungunya
[8, 9]. La demanda de niveles de control para aminorar,
prevenir e incluso erradicar estas enfermedades es de
preocupación mundial. Por ejemplo, se ha estimado que
ocurren alrededor de 390 millones de casos de dengue
a nivel mundial por año y, de ellos, 96 millones se vuelven
casos clínicos [10].
Diversos estudios se han enfocado a la búsqueda de nue-
vos productos naturales, con actividad insecticida y larvi-
cida, que puedan controlar la población de mosquitos, sin
presentar riesgos al ser humano y otros animales domés-
ticos. Por ejemplo, el insecticida Olyset Duo® contiene una
novedosa mezcla de compuestos sintéticos (permetrina y
piriproxifeno) en conjunción con IGR, un regulador de cre-
cimiento en insectos [11].
En ese sentido las plantas revisten un gran interés, debido a tra GoldfishCrisps®, México), 30% (p/p) de complemen-
que durante su evolución han desarrollado un mecanismo
de respuesta ante el estrés biótico y abiótico, produciendo
compuestos conocidos como metabolitos secundarios y
que han sido utilizados para el control de insectos; tal es
el caso de las piretrinas, producidas naturalmente por las
flores del género Pyrethrum: Chrysanthemum cinerariae-
folium y Chrysanthemum coccineum.
El presente trabajo muestra el efecto tóxico de los acei-
tes esenciales de cinco plantas colectadas en la región
sur de Veracruz, México, sobre larvas, pupas y adultos
de Anopheles spp. El propósito consistió en determinar
y comparar el potencial de los extractos etanólicos de
aceites vegetales como fuente de compuestos que pue-
dan ser útiles para combatir el crecimiento poblacional de
mosquitos vectores, causantes de enfermedades infec-
ciosas como las antes descritas.
MATERIALES Y MÉTODOS
Colecta del material biológico
El material biológico se recolectó en un radio de 20 km
de la ciudad de Acayucan, Veracruz (17° 56’ 54” N, 94°
54’ 48” W).
La recolecta vegetal consistió en semillas de neem (Aza-
dirachta indica) y hojas jóvenes de las siguientes especies:
malanga (Xanthosoma roseum), palo mulato (Bursera si-
maruba), anona (Annona reticulata) y epazote (Dysphania
ambrosioides). Inmediatamente a su llegada al laboratorio,
el material vegetal fue deshidratado en un cuarto ventilado
y protegido de la luz solar. La colecta de larvas de mos-
quito (Anopheles spp.) se realizó en aguas estancadas en
diferentes zonas del municipio de Acayucan, Veracruz.
03
Preparación de los extractos
La extracción de aceites esenciales se realizó median-
te un protocolo modificado propuesto por Castro 2010
[12]. Brevemente, el material deshidratado se trituró en
un molino de aspas y el pulverizado obtenido se colo-
có en un matraz de 500 ml con metanol grado reacti-
vo (Baker®, México) en una proporción 1:10 (20 gramos
de pulverizado por 200 ml de solvente). La mezcla se
mantuvo a temperatura ambiente en un agitador orbital
Mod. 311 DS (Labnet México), durante 24 h a 50 rpm. El
extracto obtenido se filtró por gravedad utilizando pa-
pel Whatman® con un tamaño de poro de 0.45 µm. Pos-
teriormente el filtrado, se destiló a presión reducida en
un Rotavapor® R-100 (Buchi, México) a 40°C. El material
obtenido se conservó en recipientes de vidrio de color
ámbar y se almacenó a 4°C hasta su uso posterior.
Cultivo de mosquitos.
El cultivo de mosquitos en fase adulta se realizó de
acuerdo a lo reportado por Ávila 1993 [13] con modifi-
caciones. Brevemente, se preparó un medio de cultivo
rico para larvas y pupas (MCLP), el cual consistió en 1L
agua de pozo artesiano suplementado con 3 g de la die-
ta formulada con 40% (p/p) de alimento para peces (Te-
to alimenticio (Nutralac®, México), 10% (p/p) de cereal de
maíz en hojuelas (Corn Flakes de Kelloggs®, México),
10% (p/p) de extracto de levadura (Bioxon®, México) y
10% (p/p)de caseinato de calcio (ProWinner®, México).
Las larvas colectadas de mosquito fueron transferidas
a charolas de plástico con dimensiones de 25 x 15 x 10
cm, las cuales contenían 3.25 Lts., del medio MCLP des-
crito anteriormente. Este cultivo se mantuvo en la oscu-
ridad y a temperatura ambiente durante 10 días con el
propósito de obtener pupas. Las pupas obtenidas fue-
ron transferidas a un frasco de 10 cm de diámetro por
18 cm de altura, conteniendo 0.25 Lts., de MLCP. Los
frascos con larvas fueron colocados dentro de una jaula
entomológica de 35 x 35 x 35 cm. Al cabo de 5 días, se
obtuvo una población homogénea de mosquitos en su
fase adulta con los cuales se realizaron los ensayos de
repelencia.
Prueba de repelencia y actividad biocida
Para realizar las pruebas de repelencia se modificó el
protocolo propuesto por Áviles 2013, [14]. Brevemente,
los brazos y manos de voluntarios fueron lavadas con
jabón neutro y enjuagadas abundantemente con agua.
Posteriormente, éstos se cubrieron con cada uno de los
5 extractos y un tratamiento control (Autan®, SC John-
son, México) sin diluir y se introdujeron dentro de la jaula
entomológica por 5 minutos. Durante este tiempo, se
contabilizaron los mosquitos que se suspendieron so-
bre la piel, empleándose para ello tres observadores.
El porcentaje de repelencia se estimó de acuerdo a lo
reportado por Salazar y Soto 2012 [15] empleando la si-
guiente fórmula: %R=(MB/MT)x100, donde %R, MB y MT
representan % de repelencia, mosquitos parados en el
blanco y mosquitos en el tratamiento, respectivamente.